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質粒的作用機制、條件及特點了解下

閱讀:548          發布時間:2021-11-12

質粒(plasmid) 廣泛存在于生物界,從細菌、放線菌、絲狀真菌、大型真菌、酵母到植物,甚至人類機體中都含有。從分子組成看,有DNA 質粒,也有RNA 質粒; 從分子構型看,有線型質粒、也有環狀質粒: 其表型也多種多樣。細菌質粒是基因工程中最chang用的載體。

通常,科學家利用質粒在靶細胞中進行基因的過表達。質粒的靈活性、兼容性、安全性、經濟性等特性促進了分子生物學家將其應用于各種用途。一些常用的質粒類型包括:克隆質粒、表達質粒、基因下調質粒、基因敲除質粒、報告質粒、病毒質粒等。


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克隆質粒:旨在擴增目的DNA--pian段

表達質粒:利用乳糖操縱子等結構過表達目的基因基因下調質粒:利用基因沉默(抑制mRNA翻譯)的原理減少宿主細胞內源基因的表達

基因敲除質粒:質粒中可插入基因敲除所需的元件,如用CRISPR/Cas9敲除時,質粒中含有Cas9蛋白的基因序列并插入一段設計好用來轉錄出gRNA的序列;同源重組法敲除時,質粒中插入一段目的基因的上下游同源序列

報告質粒:整合有報告基因的重組質粒。報告基因是一種編碼可被檢測的蛋白質或酶的基因,也就是說,是一個其表達產物非常容易被鑒定的基因。把它的編碼序列和基因表達調節序列相融合形成嵌合基因,或與其它目的基因相融合,在調控序列控制下進行表達,從而利用其表達產物標定目的基因的表達調控,篩選得到轉化體。

病毒質粒:對病毒的基因組進行改造,去除其致病感染性而保留其它功能,有利于目的基因靈活的進入細胞并整合到基因組中。到目前為止,quan世界的科學家在各種實驗中廣泛將質粒用于各種技術,包括熒光成像、重組DNA技術、蛋白質大規模生產、疾病模擬、藥物開發和基因編輯等,其應用之廣,使得質粒幾乎存在于現在的所有生命科學實驗室。

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