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小鼠腫瘤壞死因子-r檢測試劑盒生產廠家會提供對數坐標紙，可直接手工繪制曲線；如果酶標儀帶有分析軟件，可由軟件直接擬合曲線，并自動計算出樣本的濃度值；老式的酶標儀只能打印出OD值，需要實驗員自己繪制曲線并計算，下面介紹2種繪制競爭法曲線的方法，希望對大家有幫助：

一、在對數坐標紙上手工繪制曲線（Log-logit雙對數標準曲線）

1. 實驗做雙孔，實驗結果如下表所示。

標準點  濃度  OD1  OD2  OD均  結合率

S0  0  2.226  2.192  2.209   　

S1  0.1  1.725  1.679  1.702   77.0%

S2  0.4  1.313  1.338  1.3255   60.0%

S3  1.6  0.907  0.834  0.8705   39.4%

S4  6.4  0.517  0.517  0.517   23.4%

S5  25.6  0.230  0.244  0.237   10.7%

2）各標準點吸光值取均值。在表中OD均一列。

3）將S1~S5的OD均值與S0的OD均相除，為標準點的百分結合率。

4）在log-logit坐標紙上繪圖。

5）坐標紙上橫軸從左至右*個1-9表示為*個10進位，第二個1-9表示為第二個10進位。第三個1-9表示為第三個10進位。也就是說，如果*個1代表1ng/ml，則第二個1代表10ng/ml，第三個1代表100ng/ml。因為本次實驗標準曲線范圍是從0.1ng/ml到25.6ng/ml，則可以用*個1代表0.1ng/ml，第二個1代表1ng/ml，第三個1代表10ng/ml。

6）小鼠腫瘤壞死因子-r檢測試劑盒坐標紙縱軸為百分比。即各標準吸光值的百分結合率。

7）曲線*個數值點是（0.1，77.0%）。則在橫軸左起點的1處向上至70~80之間，由70向上7個小格處。

8）曲線第二個數值點是（0.4，60.0%）。則在橫軸左起*個4，向上至60的位置。

9）曲線第三個數值點是（1.6，39.4%）。則在橫軸左起第二個1至2之間，由第二個1向右6個小格。再向上至30~40之間，由30向上9個半小格處。

10）曲線第四個數值點是（6.4，23.4%）。則在橫軸左起第二個6至7之間，這里6與7之間分為5小格，則每個小格是0.2。所以由第二個6向右2個小格。再向上至20~30之間，由20向上約3個半小格處。

11）小鼠腫瘤壞死因子-r檢測試劑盒曲線第四個數值點是（25.6，10.7%）。則在橫軸左起第三個2至3之間，這里2與3之間分為10小格，則每個小格是1。所以由第三個2向右5個半小格。再向上至10~20之間，由10向上約半小格處。

12)畫一條通過各點的直線。要求盡可能多的點在線上，同時剩余的點均勻分布在直線的兩邊。

13）樣品也同樣由吸光值計算百分結合率，再從縱軸上的相應結合率找到直線上的點，此點對應的橫坐標濃度即為樣品的濃度。無須換算。