抗體的選用及應用范圍

[抗體的選用及應用范圍] 在臨床活檢工作中，對于各種腫瘤的正確判斷，歷來是外科病理學的核心問題。因它關系到患者的治療和預后的問題。在免疫組化技術沒開展以前，主要靠HE，特殊染色和組織化學來進行鑒別和診斷各種腫瘤，這些在當時雖然解決了不少的問題，但是對于較為復雜，較為 [抗體 抗體應用 抗體選擇 細胞 腫瘤 抗原]

在臨床活檢工作中，對于各種腫瘤的正確判斷，歷來是外科病理學的核心問題。因它關系到患者的治療和預后的問題。在免疫組化技術沒開展以前，主要靠HE，特殊染色和組織化學來進行鑒別和診斷各種腫瘤，這些在當時雖然解決了不少的問題，但是對于較為復雜，較為多型性的腫瘤，就不能對其起源及所含的成分作出正確的判斷。隨著免疫組化工作的開展，給許多以往有待于解釋原因的病理診斷上帶來了福音。許多以往無法解釋原因的病例，經現今免疫組化染色技術的處理后，能夠對其起源，相關的抗原或抗體成份給予顯示出來，為腫瘤的診斷提斷了形態學的依據。雖然如此，對于一些較為復雜的抗原，就要根據具體情況作具體分析。

在生物界里面某些細胞僅具有一個抗原的決定簇，這是極少見的，而常見的是具有數百個乃至數千個的抗原決定簇。數量之多但又不是千篇一律，并非都在細胞的表面表達出來，加上細胞的排列有高有矮，有長有短，切片時有的被切到細胞膜，有的被攔腰斬斷，因此在一張切片上看到的同一種抗原的表達也不一致，有的在細胞核，有的在細胞膜，也有的在細胞漿，這種現象是由于切片的原因所致。但是，抗原的表達，在原來的表達上就有核、漿、膜之分。有的抗原可在一個部位表達，有的抗原 則可在兩個 部位表達 ，例如PCNA，它可以在細胞核表達，也可在細胞漿表達 。有的抗原，可表現為雙向表達，如上皮(樣)腫瘤間皮腫瘤和滑膜內瘤等，用角蛋白標記時，可有陽性表達，用波形蛋白標記時，也可有陽性表達。對于上述的許多現象，在觀察檢測時，就要特別地小心，不斷地積累經驗，以便于更好地鑒別各種抗原的所在部位。某些抗原不是在任何時候能表達出來的它們 需要一定的時間和條件。有人根據腫瘤細胞增生的能力將其分為三個階段：

1.進入細胞周期的增殖細胞，這包括G1、G2及M期的細胞。

2.暫時未進入細胞周期，但在某特定的時期和條件下，使其開始增殖的細胞(G0期)。

3. 靜止的再進入增殖周期的細胞，這些細胞己分化成熟，根據新陳代謝的規律，它們逐漸地進行消之階段。

上述三個階段中，與腫瘤的發生發展關系zui為密切的是增殖細胞。因此，臨床檢測各種腫瘤抗原的表達，應根據上述 三個階段來加以區別，仔細加以分析，在作出診斷前，應根據免疫組化的表達，細胞的分化成度來加以區別，不要以為用了某種抗體抗原不表達就確定是不屬該抗體來源的腫瘤。有人在檢測淋巴瘤活性的研究中，發現PCNA在細胞周期的S期數量增高，G2期下降，核分裂期zui低，在 G1期又開始增高。我們在檢測各種腫瘤的抗原時發現，在同一病例中，增生的腫瘤細胞抗原表達強，成熟的細胞表達與增生的細胞差不多，幼雅的細胞表達較弱，未分化的細胞呈陰性。基于上述的情況，我們應充分認識到，診斷各種腫瘤，免疫組化起到了重要的作用中，它可以為診斷提供可靠的準確的形態學依據，它為腫瘤的來源的定性，提供了理論及實物。但是，我們也應該認識到，任何事情都 不能有的準確，免疫組化的檢測也一樣，有時也會受到未分化細胞的制約，因此，在作出診斷前，應多做多方面的檢查，結合各方面的情況，作出正確的判斷。為了更好地應用各種抗體來檢測相應的抗原，下面我們將介紹常用抗體檢測范圍。

(一)、常用上皮組織及腫瘤標記物

角蛋白(Keratin)

角蛋白分為表皮角蛋白和細胞角蛋白兩種，這是根據其分部的部位而分的。表皮角蛋白包括皮膚表皮，消化道粘膜上皮、腺上皮甲狀腺濾泡上皮、氣管、支氣管上皮、肺泡上皮，角膜上皮、前列腺上皮等。細胞角蛋白包括頜下腺，胰腺，胸腺，細胞，肝細胞，腎小管細胞等。目前，應用上述細胞中間絲角蛋白作為抗原所制備的抗體有單克隆抗體和多克隆抗體。角蛋白可有19個亞型 ，分為堿性和酸性，從1-8為堿性，9-19為酸性，分子量40-68不等，復層鱗上皮多為高分子量，單層上皮則多為低分子量，了解這些在臨床的鑒別診斷及抗體的應用中都 有*的幫助。目前，檢測這類特質的抗體很多，根據不同的克隆生產出不周類型的抗體。常用的抗體有：

①單克隆小鼠抗人細胞角蛋白(Monoclonal mouse anti human cytokeratin)克隆為MNF116。

該抗體應用范圍，各類的冰凍切片，涂片，細胞培養片和經甲醛固定石蠟包埋的組織切片 。用本抗體檢測的陽性組織有：鱗狀上皮，甲狀腺濾泡上皮消化道上皮，胰腺膽管上皮，肝膽管上皮，角膜上皮等以及發生于上述來源的腫瘤。應該注意的是有一些腫瘤在檢測時，可出現兩種陽性物，即用兩種抗體來檢測如采用CK和Vimentin，可出現雙向表達陽性的腫瘤有：癌內瘤，子宮內膜腺癌肺腺癌，上皮樣內瘤，滑膜內瘤，唾液腺肌上皮瘤，間皮瘤等等。這是由于在這些腫瘤中存在著兩種不同的中間絲的緣故。

應用該抗體檢測呈陰性的腫瘤有：各種淋巴瘤，各類肌源性的腫瘤，惡性黑色素瘤(melanoma)，骨腫瘤，纖維組織腫瘤，脂肪腫瘤，神經組織腫瘤和精原細胞瘤等。

在檢測某些腫瘤時，常可出現這樣的問題，在同一張切片上，同樣的鱗狀細胞癌的細胞，有的抗原表達為強陽性，有的表達為中度陽性性，有的表達為弱陽性，甚至有的呈陰性。這主要是由于各種細胞處于增生的不同階段，細胞分泌的抗原量不同，因而表達 也不同。