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上海滬鼎生物科技有限公司
主營產品: 進口ELISA試劑盒,人酶聯免疫試劑盒,抗體價格,小鼠酶聯免疫試劑盒,gibco血清,大鼠酶聯免疫試劑盒 |

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2016-10-25 閱讀(303)
許多試劑檢測都涉及到標準曲線的問題,標準曲線做的好與壞會直接影響到實驗的結果,甚至是關系到實驗的成敗,那么ELISA的標準曲線如何擬合??
一般情況按照說明書*方法擬合標準曲線。標準曲線可以由酶標儀附帶軟件自動生成,也可手動制作。標準曲線呈“S”形曲線,兩端趨于水平,中間趨于線性,中間部分為較佳的檢測范圍。當標準品的量超過與包被抗體結合的量,此時標準品已飽和,再增加標準品的量,其OD值不再變化,故當標準品達到一定濃度后,曲線就趨于水平。一般廠商給出的濃度范圍落在中間線性范圍,根據標準曲線,可以測出樣本的濃度。按照科學分析方法,如果存在“奇異點”或者“污點”,直接采用線性分析不是很好,要對擬合標準曲線的幾個點進行取舍,同時也可改用雙對數直線擬合或者四因素曲線擬合。
以標準物的濃度為縱坐標(對數坐標),OD值為橫坐標(對數坐標),在對數坐標紙上繪出標準曲線。*使用專業制作曲線軟件進行分析,如curve expert 1.3,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度,再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
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